【摘要】采用優(yōu)化的同時蒸餾萃取前處理方法,以乙酸苯乙酯為內(nèi)標(biāo),對分別種植在河南、湖北、廣東省,研究不同生態(tài)條件下烤煙中性致香物質(zhì)進(jìn)行了GC-MS/SIM分析,準(zhǔn)確測定了卷煙中β-紫羅蘭酮、糠醇等34種中性香味成分.結(jié)果表明:中性香味成分的回收率為73.05％ ～ 97.35％,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)小于10％,其中20種成分的回收率高于80％。
　　【關(guān)鍵詞】煙草；類型；中性致香成分；氣相色譜—質(zhì)譜法；選擇離子
　　煙草是茄科一年生草本植物，煙草屬大約有60多種，但真正用于制造卷煙和煙絲的，基本只有紅花煙草，此外還有少部分用黃花煙草，其他品種很少用。煙葉中含有一種由單糖與酚類組成的化合物，稱之為苷。它們是組成煙葉色素和樹脂物質(zhì)的成分。苷類性質(zhì)都不安定，易被催化分解。當(dāng)煙葉成熟之后，或在干制、發(fā)酵過程中，由于酶催化的結(jié)果，煙葉中的苷類物質(zhì)發(fā)生強(qiáng)烈水解。苷類物質(zhì)的分解產(chǎn)物往往具有令人快慰的香氣。因此，苷類物質(zhì)被認(rèn)為是產(chǎn)生煙芳香氣味的重要物質(zhì)之一。
　　1.材料與方法
　　1.1材料，試劑和儀器
　　不同地區(qū)煙葉樣品：
　　檸檬酸: 化學(xué)名稱：2-羥基-1,2,3-已三酸, 分子式：C6H8O7, 分子量：192.14, 白色結(jié)晶粉末，無臭。熔點（℃)：153攝氏度
　　沸點（℃)：(175℃分解)
　　相對密度(水=1)：1.6650；閃點(℃)：100；引燃溫度(℃)：1010(粉末)）爆炸上限%(V/V)：8.0(65℃)；檸檬酸是一種重要的有機(jī)酸，又名枸櫞酸，無色晶體，常含一分子結(jié)晶水，無臭，有很強(qiáng)的酸味，易溶于水。其鈣鹽在冷水中比熱水中易溶解，此性質(zhì)常用來鑒定和分離檸檬酸。結(jié)晶時控制適宜的溫度可獲得無水檸檬酸。在工業(yè)，食品業(yè)，化妝業(yè)等具有極多的用途。
　　硝基苯（0.37mg/ml）分子式：C6H5NO2，分子量：123.11，硝基苯，有機(jī)化合物，又名密斑油、苦杏仁油，無色或微黃色具苦杏仁味的油狀液體。難溶于水，密度比水大； 易溶于乙醇、乙醚、苯和油。遇明火、高熱會燃燒、爆炸。與硝酸反應(yīng)劇烈。硝基苯由苯經(jīng)硝酸和硫酸混合硝化而得。作有機(jī)合成中間體及用作生產(chǎn)苯胺的原料。用于生產(chǎn)染料、香料、炸藥等有機(jī)合成工業(yè)。相對密度1.205(15/4℃)，熔點：5.7℃，沸點：210.9℃，閃點：87.78℃，自燃點：482.22℃，蒸汽密度：4.25，蒸汽壓：0.13kPa(1mmHg44.4℃)，溶解度：難溶于水，密度比水大;易溶于乙醇、乙醚、苯和油。遇明火、高熱會燃燒、爆炸。與硝酸反應(yīng)劇烈。
　　二氯甲烷：分式：CH2Cl2。相對分子質(zhì)量：84．93。無色液體。有醚樣氣味。易揮發(fā)。其氣體不燃燒，與空氣混合也不爆炸。能與乙醇、乙醚和N，N-二甲基甲酰胺混溶，溶于約50份水中。相對密度（d204）1.3255。凝固點-95℃。沸點 39.75℃。折光率（n20D)1.4244。低毒，半數(shù)致死量（大鼠，經(jīng)口)2524mg/kg。高濃度蒸氣有麻醉性。有刺激性。是不可燃低沸點溶劑，常用來代替易燃的石油醚、乙醚等，并可用作牙科局部麻醉劑、制冷劑和滅火劑等。
　　石油醚：熔點(℃)：<-73；相對密度（水=1）：0.64～0.66；沸點(℃)：40～80；相對蒸氣密度（空氣=1）：2.50；主要成分：戊烷、己烷。飽和蒸氣壓(kPa)：53.32(20℃)；閃點(℃)：<-20；爆炸上限%(V/V)：8.7；引燃溫度(℃)：280；爆炸下限%(V/V)：1.1溶解性：不溶于水，溶于無水乙醇，氯仿，油類等多數(shù)有機(jī)溶劑。揮發(fā)性：易揮發(fā)；極性：0.01.屬于弱極性有機(jī)溶劑，常與其他強(qiáng)極性溶劑（如：乙酸乙酯）混合作為薄層色譜分析的展開劑無色透明液體，有煤油氣味。為戊烷和己烷的混合物。不溶于水，溶于無水乙醇、苯、氯仿、油類等多數(shù)有機(jī)溶劑。易燃易爆，與氧化劑可強(qiáng)烈反應(yīng)。主要用作溶劑和油脂處理。通常用鉑重整抽余油或直餾汽油經(jīng)分餾、加氫或其他方法制得。
　　HP5890II-5972氣質(zhì)聯(lián)用儀，工作條件：色譜柱為HP-5（60m*0.25mm，0.25um）；進(jìn)樣口溫度：280℃；載氣：He；流速：0.8mm/min；進(jìn)樣量2L；分流比1:15；電離能70eV；電離方式EI；質(zhì)量數(shù)范圍50～500amu。
　　程序升溫：50℃（保持5分鐘）升至120℃（保持5分鐘），速度為5℃/min；自120℃升至180℃（保持5分鐘），速度為5℃/min；再自180℃升至250℃，保持15min，速度為6℃/min。采用NIST02普庫檢索定性。假設(shè)相對校正因子為1，采用內(nèi)標(biāo)法測量。
　　1.2中性致香成分含量分析
　　煙葉去梗后，放入烘箱內(nèi)，在40攝氏度下干燥2小時，粉碎，過40目篩。稱取25.0克煙末置于SDE裝置一端的1000毫升平底燒瓶中，并向其中加入350毫升飽和食鹽水溶液，電熱器加熱；裝置的另一端接裝有60毫升二氯甲烷的250毫升圓底燒瓶，60攝氏度水浴加熱；調(diào)節(jié)加熱溫度使水相和有機(jī)相的餾出速度相同，控制KPGD-5型高低溫循環(huán)槽冷凝水的溫度為15攝氏度，萃取2小時；將二氯甲烷萃取溶液冷卻至室溫，加入適量的無水硫酸鈉干燥過夜，過濾，濾液中加入25微升IS（1.1623mg/mL），常壓下60攝氏度水浴中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至1毫升后用氣相色譜—質(zhì)譜儀鑒定結(jié)果，用NIST庫檢索定性分析。
　　2.結(jié)果
　　烤煙葉面腺毛密度和葉面分泌物在不同生態(tài)區(qū)和基因型間存在著差異,腺毛密度表現(xiàn)為河南較高,湖北次之,廣東較低。葉面分泌物含量表現(xiàn)為湖北較高,廣東次之,河南較低。在不同生態(tài)區(qū)H892的腺毛密度和葉面分泌物含量均高于對照品種K326,分析表明:生態(tài)是影響煙葉腺毛密度的主要因素,基因型對葉面分泌物的含量影響較大�？緹熓�油醚提取物含量在不同生態(tài)區(qū)表現(xiàn)為:廣東略高于湖北,河南最低�？緹熓�油醚提取物含量在基因型間存在著差異,湖北和河南地區(qū)石油醚提取物含量H892K326,廣東地區(qū)K326H892,差異均達(dá)到了顯著水平。石油醚提取物含量在生態(tài)和基因型間互作效應(yīng)極顯著�？緹熧|(zhì)體色素含量在不同生態(tài)區(qū)和基因型間存在著差異,葉綠素a、葉綠素b含量廣東較高,河南次之,湖北較低,類胡蘿卜素含量廣東較高,湖北次之,河南較低。除河南地區(qū)葉綠素a、廣東葉綠素b含量H892和K326差異不顯著外,不同基因型同一生態(tài)區(qū)葉綠素a、葉綠素b、類胡蘿卜素含量表現(xiàn)為H892顯著或極顯著高于K326。葉綠素a、葉綠素b含量在生態(tài)和基因型間互作效應(yīng)極顯著,類胡蘿卜素含量無顯著互作效應(yīng)�？緹熤行韵銡獬煞趾�量在不同生態(tài)區(qū)和基因型間表現(xiàn)為,河南中性香氣成分含量較高,廣東煙葉中僅西柏烷類含量比湖北稍低,其余4種物質(zhì)含量均比湖北高。H892西柏烷類含量低于K326,類胡蘿卜素、棕色化反應(yīng)產(chǎn)物、苯丙氨酸類和總香氣物質(zhì)含量均高于K326。3個生態(tài)區(qū)煙葉總香氣物質(zhì)含量的變異率低于基因型間變異率,表明煙葉中總香氣物質(zhì)含量受生態(tài)影響較小,基因型間差異較大�？緹煶Ｒ�(guī)化學(xué)成分含量在不同生態(tài)區(qū)和基因型間存在著差異,總糖、還原糖和淀粉含量湖北較高,廣東次之,河南較低,煙堿含量廣東較高,河南次之,湖北較低。不同基因型同一生態(tài)區(qū)總糖、還原糖含量H892K326。不同基因型的淀粉含量在不同地區(qū)表現(xiàn)不一致,廣東和河南地區(qū)H892K326,湖北地區(qū)K326H892。煙堿含量在湖北地區(qū)表現(xiàn)為H892K326,廣東地區(qū)K326H892,河南地區(qū)兩者含量幾乎相等。總糖含量在生態(tài)和基因型間互作效應(yīng)顯著,還原糖、淀粉、煙堿、總氮含量互作效應(yīng)達(dá)極顯著水平。
　　3.討論
　　各地?zé)煵葜�，新植二烯的含量都占絕對優(yōu)勢，而新植二烯在云南煙葉中的含量較高，使云南煙葉具有濃烈的清香氣味。地方煙葉中，萬源巫煙的總的中性致香成分含量最高。類胡蘿卜素和新植二烯都會對煙葉的清香產(chǎn)生積極影響。
　　4.結(jié)論
　　不同地區(qū)煙葉中的中性致香物質(zhì)含量和組成比例差異較為顯著。煙類中各種致香物質(zhì)含量是其香味的主要影響因素。云煙的中性香味物質(zhì)做的分析研究,篩選出有云煙香味、組成較簡單的香味物質(zhì)組(集份),從香味物質(zhì)組鑒定出129種成分。云煙特征香味是多種香味物質(zhì)按一定比例組成的。與河南烤煙香味物質(zhì)初步對比分析也證實,云煙的清香與河南煙的濃香都是多種香味成分按各自不同比例組成的綜合感官質(zhì)量的反映�！�[科]
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