寫在起始：鑒于有些新入行做原料藥的同學對化合物的純化方法了解的較少，研究過程中不知該如何純化目標產品，故根據(jù)個人幾年工作經歷，對實驗室中接觸到的常用純化方法進行小小的總結 實驗室中常用的純化手段

　做新藥仿制藥研發(fā)過程中工藝占很大比重，做工藝較多的同學們都會遇到這樣的問題，我好不容易把產品合成出來了，結果純度達不到要求，一個純化占據(jù)了大部分的研發(fā)時間，面對主管領導期盼的雙眼、猙獰的面孔，恨不得能化身超體中的女神斯嘉麗進入分子位面用手抓出雜質扔進垃圾堆。

　 說正事，常用的純化主要分為重結晶純化及其它純化；其它純化包含的內容比較多，比如打漿、過柱、吸附等。

　 1. 實驗室主要重結晶純化操作 先說說重結晶，重結晶一般操作為冷卻結晶、溶析結晶（也叫反溶劑結晶）、蒸發(fā)結晶、熔融結晶等，前兩種屬于溶液結晶的內容，而熔融結晶主要在分離異構體等文獻中較多，可憐我就知道手性拆分，到現(xiàn)在還沒接觸過熔融結晶。

　 1.1 冷卻結晶：將待純化產品加入某一溶劑中加熱至溶清后再降溫析晶的過程稱為冷卻結晶。

　常說的冷卻重結晶一般操作為將粗品與適當?shù)娜軇┘訜嶂寥芙�，趁熱過濾（如不需要除機械雜質則該步略去），降溫析晶，過濾干燥。冷卻結晶應

　該是大家使用最多的了，這一條中包含溶劑選擇的原則相信同學們接觸的也最多，我就少水點字數(shù)吧。

　選擇適宜的溶劑是重結晶的關鍵之一，適宜的試劑應符合下述條件：

�。�1）與被提純的化合物不起化學作用（這句是廢話）。

�。�2）化合物應易溶于熱溶劑中，而在冷溶劑中幾乎不溶；反向也有，沒接觸過。

　（3）對雜質的溶解度應很大或很小。

　（4）能得到較好的晶體，當然無定型也有，有時還得多加個轉晶型過程。

　（5）溶劑的沸點適中。過低則溶解度改變不大，難分離，操作也困難；過高則溶劑不易除去造成溶劑殘留超標。

　（6）單一溶劑優(yōu)先，三類溶劑優(yōu)先，操作安全優(yōu)先（避免低閃點溶劑）。

　 在選擇溶劑時應根據(jù)“相似相溶”的一般原理。溶質往往易溶于其結構相似的溶劑中。一般來說，極性的溶劑溶解極性的固體，非極性的溶劑溶解非極性的固體。在實驗中往往要通過很多次實驗才能確定使用哪一種溶劑（好像也是廢話）。

　 一句話，重結晶溶劑的選擇一般原則是對粗產品的熱溶解度大，冷溶解度小，對雜質溶解性冷熱都大或者冷熱都小，產品在重結晶溫度下穩(wěn)定性要

　好；溶劑的沸點不宜過高或過低，主要利用產品與雜質在不同溶劑中溶解度的差異選擇目標溶劑。

　1.2 反溶劑結晶：將待純化產品 用某一良溶劑溶解，再向其中加入不良溶劑析出產品的過程。

　反溶劑結晶也稱作抽提結晶，多用于制藥行業(yè)。反溶劑結晶法是將良溶劑（也稱為正溶劑）與不良溶劑(即反溶劑)結合使用，通過添加不良溶劑降低待結晶物在溶劑中的溶解度達到析晶純化的目的。

　反溶劑結晶有兩個原則：①正反溶劑要相溶，②待重結晶物溶于正溶劑，不溶于或微溶于不良溶劑。

　 反溶劑結晶說起來簡單輕松，但實際操作起來也挺復雜，一是正反溶劑的選擇要經過大量篩選；二是正反溶劑的用量，良溶劑不能太多不然產品損失大，不良溶劑的量也很頭疼，加多了沒純化效果，加少了損失又太大，還是要多做用量篩選。

　 1.3 蒸發(fā)結晶：將待純化產品溶解后自然揮發(fā)或蒸除大部分溶劑以析出產品的過程。

　說到蒸發(fā)結晶，不得不提起一段悲傷的回憶，當年組長讓我把化合物溶了旋蒸純化下，當時我是一臉的呆傻，這特么咋純化，然后糾結了半天問組長咋做（為啥糾結？我覺得組長太丑），組長直接發(fā)過來十幾篇結晶文獻讓我仔細看，完了還特么抽查學習成果- -！

　說正事，蒸發(fā)結晶一般是待純化物溶了后通過旋蒸或常壓蒸餾去除大部分溶劑，過程中會優(yōu)先析出純度較高的產品，待剩余溶劑較少后直接抽濾，大部分雜質會隨著母液一起分離。另外晶型研究中可用于單晶培養(yǎng)、無定型晶種制備等，就是把化合物溶清過濾后靜置緩慢揮發(fā)。

　2. 常用其他純化操作 2.1 打漿純化

　這個沒什么說的，就是找到利用雜質和產品在某一溶劑中溶解度的不同進行打漿除雜，打漿操作一般以去除液體反應殘留物料或難干燥溶劑較多。

　 2.2 柱層析純化

　上面還說有一把 40 米大刀呢，這會兒又提到柱層析了，不過我臉皮厚，盡管批評我吧！

　 說實話，做新藥及仿制藥滿打滿算四年多了，原料藥工藝中需要過柱的只見過一次，唯一的那個項目也僅是過快速柱除雜的思路。不能否認柱層析的純化效果，但是原料藥項目如果使用柱層析純化會消耗大量溶劑產生大量的廢液，其生產成本太高。所以研究階段應盡量避免柱層析，實在繞不過去最好能改用過快速柱法純化。

　2.3 成鹽及解離、更改鹽形式純化

　 將待純化產品在溶解狀態(tài)下成鹽后再解離，或改變產品鹽基用以去除大部分雜質的操作。

　 這一條手性拆分用的應該是最多的了。由于鹽形式的變化會顯著影響溶解度，因此這是另一種有用的結晶技術。舉例來說，目標化合物可能在所選溶劑中溶解度低。但成鹽后，它的溶解度顯著變大并能完全溶解。冷卻和反溶劑結晶都可以得到純的目標化合物的鹽。另一種情況是，目標化合物能溶解在所選溶劑中，而成鹽后在此溶劑中的溶解度低。

　 2.4 酸堿析晶純化

　將待純化產品調酸堿后溶于水中，再反向調 PH 析出產品的過程。該方法對于易溶于水的雜質去除效果極佳。

　2.5 活性炭或硅膠或硅藻土吸附純化

　活性炭吸附、硅膠吸附除雜主要操作為將待純化產品在某一溶劑中加熱溶清后再加活性炭或硅膠，攪拌一定時間后趁熱過濾，母液降溫析晶即可。其中活性炭及硅膠的添加量一般是 1-5%。該純化法能去除吸附性較好的雜

　質，還能順便脫個色。當然，如果硅膠或活性炭對產品的吸附性也很好，那收率就會降低好多。

　硅藻土其主要成分與硅膠類似，常用于溶清待純化產品抽濾前的鋪墊。一般的操作為將待純化產品溶清后，將硅藻土或硅膠鋪墊于漏斗上再進行抽濾，其實說白了就是一個過快速短柱的辦法，該方法對大極性雜質及鈀等重金屬的去除效果較好，至于其它雜質那得看它心情了。

　 2.6 制備分離（正反相制備或 HPLC 制備）

　制備分離一般是利用液相收集特定峰，常用于雜質研究過程。

　這一條絕對是合成人員的最愛了，雜質研究過程中因為分離及合成的雜質量都比較少，要將雜質提純最好的方法莫過于制備分離了，樣品送給分析人員然后坐等雜質分離收集好豈不美滋滋。條件好的公司一般都會配備，沒條件的？那只能手動過小柱子了。

　2.7 薄層色譜分離 一句話，刮小板或刮大板（你懂的），一般在雜質研究及制備中常用，畢竟一塊大板最多也就涂 20mg 待分離產品。

　2.8 蒸餾和精餾操作 蒸餾是一種分離液體混合物的方法；精餾是多次簡單蒸餾的組合。精餾是蒸餾的一部分，一般用于幾個組分的分離，主要是異構體分離。其實吧可以簡單點理解，有回流操作的蒸餾是精餾，沒有回流的只是蒸餾。

　說到蒸餾，真的是比過柱子純化效果還好，可惜局限性太大。常用于油狀中間體的純化。

　2.8 干燥（鼓風、真空、凍干）

　沒錯，干燥也是純化的一種手段，有效的干燥方式能將溶劑殘留控制在標準范圍內，比較難以去除的溶劑如甲苯、乙腈等，其質量標準中限度都很低，烘干方式、溫度、時長等都會對去除效果有很大影響，所以對干燥條件的考察也很重要。這段是水字數(shù)的，可以略過。什么？你說我為啥不寫前面？我才不告訴你！

　寫在結尾：

　由于筆者水平有限，經驗不足，寫的很粗略淺顯，歡迎大家來微信藥事縱橫合成群交流探討。

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