現(xiàn)代分子生物學技術(shù)在食品、藥品微生物檢測中的應(yīng)用
發(fā)布時間:2018-07-02 來源: 幽默笑話 點擊:
[摘 要]近年來隨著時代的快速發(fā)展,食品藥品行業(yè)也得到快速發(fā)展,但食品藥品安全問題層出不窮,引起了社會各界人士的關(guān)注和重視。隨著科技進步與發(fā)展,現(xiàn)代分子生物學技術(shù)也在相關(guān)行業(yè)中得到應(yīng)用,在微生物檢測和分類中的應(yīng)用明顯提高了檢測技術(shù)水平,通過微生物檢測可以獲得精準結(jié)果,節(jié)省時間,有效提高工作效率。本文就對現(xiàn)代分子生物學技術(shù)在食品藥品微生物檢測中的應(yīng)用進行探討與分析。
[關(guān)鍵詞]現(xiàn)代分子生物學技術(shù);食品藥品;微生物檢測;應(yīng)用
中圖分類號:S803 文獻標識碼:A 文章編號:1009-914X(2018)24-0163-01
隨著食品行業(yè)與藥品行業(yè)的快速發(fā)展,食品藥品安全問題與質(zhì)量問題對人們的生命健康及安全有著密切的聯(lián)系,并產(chǎn)生直接的影響,但從目前情況來看,食品藥品安全問題不斷發(fā)生,主要是由于當前的食品藥品檢測技術(shù)較為落后,難以滿足食品藥品行業(yè)發(fā)展的要求,因此對于新食品藥品檢測技術(shù)的研究與探討是具有重要的現(xiàn)實意義的。而現(xiàn)代分子生物學技術(shù)主要是由多種技術(shù)所共同組成的,根據(jù)行業(yè)專家學者對于DNA分子雙螺旋結(jié)構(gòu)進行不斷深入探索,并對基因與染色體研究發(fā)展成熟,使傳統(tǒng)食品藥品檢測技術(shù)的缺點得到克服,在食品藥品微生物檢測中得到廣泛應(yīng)用,為食品藥品安全及質(zhì)量提供充足的保障。
一、現(xiàn)代分子生物學技術(shù)分析
。ㄒ唬┚酆厦告準椒磻(yīng)技術(shù)
聚合酶鏈式反應(yīng)技術(shù),即PCR,從實質(zhì)上來看可以將其作為DNA的一種體外復制,該技術(shù)主要是將大量微量DNA擴增,并根據(jù)染色體和基因來對微生物基因型加以明確,因此在微生物檢測中得到廣泛應(yīng)用。聚合酶鏈式反應(yīng)技術(shù)主要是在體外對特定DNA分子片段進行高速擴增,并在滿足外界高溫等條件下,對雙鏈DNA進行解旋,使其變?yōu)閱捂,并降低其溫度,在DNA聚合酶作用下將其和引物互補配對,從而形成新的DNA雙鏈結(jié)構(gòu)。合成新雙鏈結(jié)構(gòu)可以將其作為繼續(xù)擴增模板,并給予合適溫度與環(huán)境,進行無限擴增。該技術(shù)重點是嚴格控制其溫度,PCR技術(shù)雖然比傳統(tǒng)的食品藥品微生物檢測方法靈敏度較高,且檢測時間短,特異性較強,但同時也存在諸多問題,該技術(shù)合成引物對于技術(shù)性要求較高,PCR技術(shù)的靈敏度較高,在檢測過程中會出現(xiàn)將微量外源污染DNA作為有害微生物,從而產(chǎn)生假陽性。
。ǘ┗蛐酒夹g(shù)
基因芯片技術(shù)是將固定標記與已知序列DNA探針進行雜交,并進行核苷酸測序,對樣品進行分析與檢測。在這一技術(shù)中還包括有計算機學科、物理學科與化學學科等,是一種高度交叉的技術(shù),在微生物檢測、新基因?qū)ふ液团R床藥物檢測和臨床診斷中得到廣泛應(yīng)用。該技術(shù)同時具有自動性、多樣性、微型化等特點,在同一芯片中對于多種類生物分子進行檢測,當前基因芯片技術(shù)在食品與藥品檢測中還沒有得到應(yīng)用,而在基因表達分析與蛋白質(zhì)檢測中取得了顯著的成效。
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變性梯度凝膠電泳技術(shù)主要是DNA在不同濃度變性劑中會產(chǎn)生不同的連接程度,所產(chǎn)生的電泳遷移率也會不同,而根據(jù)不同的電泳遷移率堿基分離所組成的DNA片段也會不同,該項技術(shù)與DNA測序技術(shù)可以聯(lián)合使用,從而對食品藥品菌落組成成分進行分析。變性梯度凝膠電泳技術(shù)在對微生物檢測中可以對微生物種群動態(tài)活性與多樣性進行探究,為人類對自然生物群落的研究指明了方向,但不可避免的是該項技術(shù)仍然存在一定的局限性,當前仍不能檢測出微生物代謝活性與數(shù)量。
二、現(xiàn)代分子生物學技術(shù)在食品藥品微生物檢測中的應(yīng)用
(一)聚合酶鏈式反應(yīng)技術(shù)在食品藥品微生物檢測中的應(yīng)用
1.在轉(zhuǎn)基因食品檢測中的應(yīng)用
現(xiàn)階段轉(zhuǎn)基因食品大量出現(xiàn)在人們的生活中,而這些食品的出現(xiàn)是基于現(xiàn)代基因技術(shù)發(fā)展而來的,在轉(zhuǎn)基因食品中含有大量新的DNA和蛋白質(zhì),轉(zhuǎn)基因食品安全問題一直是人們密切關(guān)注和重視的問題,只有加強對轉(zhuǎn)基因視頻的專業(yè)檢測,才能確保消費者可以大膽、放心購買。當前對于轉(zhuǎn)基因食品檢測方法主要有蛋白質(zhì)檢測法、PCR檢測法和蛋白酶活性檢測法等,其中聚合酶鏈式反應(yīng)技術(shù)是所有檢測方法中最為安全的,與其他兩種方法相比具有不同的優(yōu)勢,由于酶和蛋白質(zhì)主要成分為蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)的易變性失活,因此在專業(yè)檢驗中并不適用。PCR技術(shù)作為一種具有較高靈活性、特異性和敏感性的技術(shù),可以對于低含量轉(zhuǎn)基因成分進行檢測。而熒光定量技術(shù)屬于新型PCR技術(shù),在該項技術(shù)中加入熒光基因,在PCR檢測過程中應(yīng)用了熒光信號,對于傳統(tǒng)PCR檢測方法中的假陽性問題與準確度低的問題成功解決。
2.在致病食品微生物檢測中的應(yīng)用
在致病食品中的微生物主要包括有肉毒梭菌、弧菌、沙門氏菌和單核細胞增生性李斯特氏菌,在對這類致病微生物檢測中采用PCR技術(shù)具有較高的敏感性和迅速性特點,這也是傳統(tǒng)檢測技術(shù)所無法解決的問題。在牛奶等食品中單核細胞增生性李斯特氏菌是主要病原菌,在對食品中DNA提取中采用裂解法來進行提取,用半套式PCR技術(shù)進行檢測,通過特殊合成引物來進行特異性擴增,對于其他菌類不會產(chǎn)生反應(yīng)。與傳統(tǒng)PCR技術(shù)相比較而言,半套式PCR檢測技術(shù)的敏感性較高,檢測時間較短,通常只需5、6個小時。而肉毒梭菌是肉類食品中常見的致病菌,在檢測過程中傳統(tǒng)的檢測技術(shù)對肉毒梭菌進行提取需要多天,對肉毒神經(jīng)霉素的檢測,選擇相應(yīng)的基因序列,通過合成特定引物來對A、B、E等多種毒素基因進行復制,加快檢測速度,但由于PCR技術(shù)只能檢測出是否存在肉毒梭菌,但無法對于霉素與菌是否并存狀態(tài)進行判斷。因此在對肉毒梭菌檢測中PCR技術(shù)只能作為一種參考。
3.在藥品檢測中的應(yīng)用
在藥品微生物檢測中主要采用的是PCR實時熒光技術(shù),與傳統(tǒng)檢測技術(shù)相比更加準確、迅速的對藥品中金黃色葡萄球菌進行檢測。
。ǘ┳冃蕴荻饶z電泳技術(shù)的應(yīng)用
在對菌落變化和食源性致病菌檢測中變形地圖凝膠技術(shù)得到廣泛應(yīng)用,通過對變形梯度凝膠技術(shù)與聚合酶鏈式反應(yīng)技術(shù)進行優(yōu)化,并與DNA測序技術(shù)相結(jié)合,對于不同地區(qū)中川穹真菌差異性進行分析,從而得出川穹種群系統(tǒng)結(jié)構(gòu)多樣性的特點。
結(jié)語
綜上所述,目前人們在日常生活中食品藥品安全問題是最受關(guān)注的一個話題,為確保食品藥品安全,就要加強對食品藥品的安全檢測,對其中所含有的致病微生物進行快速、準確的檢測。雖然傳統(tǒng)檢測技術(shù)可以滿足其基本檢測條件,但檢測效率較低,且成本高,如將其和其他檢測技術(shù)相結(jié)合,則可以有效克服其自身的問題,這也是未來食品藥品檢測的主要手段。
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