[摘要] 該實驗主要研究了超微粉碎技術(shù)對三七藥材粉碎效果及有效成分含量的影響。以三七微粉粒徑大小為指標，利用馬爾文粒徑測定儀測定粉碎不同時間所得到三七微粉的粒徑并采用HPLC-ELSD對三七超微粉碎前后，人參皂苷Rg₁，Rb₁和三七皂苷R₁的含量進行了測定。結(jié)果顯示超微粉碎2 h的藥材粉末粒徑均一，達到了細胞級粉碎，D₅₀約為9.599 μm，粒徑分布為單峰，粉碎0.5，1，1.5 h的粒徑分布均為雙峰；超微粉碎0.5，1，1.5，2 h所得三七微粉中3種皂苷類成分總量分別為7.7%，7.5%，7.5%，8.3%，普通粉碎所得三七藥粉中的3種皂苷總量約為5.0%，通過以上實驗可以看出：超微粉碎與否對三七粉粒徑均勻度及其主要成分含量有很大影響；與普通粉碎藥粉相比，超微粉碎2 h藥粉粒徑較為均一，3種皂苷含量明顯增加，為臨床減少三七用藥劑量及合理利用資源提供依據(jù)；但其皂苷總量與粉碎時間不成正比關(guān)系，可以結(jié)合粒徑大小需求選擇不同的粉碎時間。
　　[關(guān)鍵詞] 皂苷；超微粉碎；粒徑；含量
　　[收稿日期] 2013-12-27
　　[基金項目] 2009年中醫(yī)藥行業(yè)科研專項（200907001-5）；北京市共建項目專項
　　[通信作者] 李慧，博士，研究員，研究方向為中藥新劑型研究與新藥開發(fā)，Tel：（010）64014411-2957， E-mail：lihuiyiren@163.com
　　[作者簡介] 王艷萍，碩士研究生，E-mail：mengtouxiaozi@163.com
　　三七為五加科人參屬多年生草本植物三七Panax notoginseng （Burk.） F.H.chen的干燥根和根莖[1]，又名參三七、田七、土三七、血山草等，具有散瘀止血、消腫止痛等功效，主要應用于各種出血證，被現(xiàn)代中藥藥物學家稱為“參中之王”，現(xiàn)代藥理研究表明，三七對血液、心血管、神經(jīng)、免疫等系統(tǒng)等均具有廣泛的作用，在臨床上廣泛應用的名貴藥材之一[2]。
　　超微粉碎是利用機械或流體動力的方法克服固體內(nèi)部凝聚力使之破碎。與傳統(tǒng)粉碎相比，超微粉碎可使中藥材細胞破壁率達95%以上并且能打碎細胞，使細胞內(nèi)外的有效成分充分暴露出來，提高溶出率；中藥超微粉粒徑一般在75 μm以下，明顯提高粉末的均勻性，從而使制劑的質(zhì)量得到改善。近年來，超微粉碎技術(shù)主要應用于一些貴重藥材或者稀少的中藥材品種上[3-4]，減少資源浪費，提高藥物吸收率[5-6]。本研究主要是對三七藥材進行不同時間超微粉碎，同時采用HPLC-ELSD測定3種皂苷類成分的含量，研究超微粉碎技術(shù)對三七藥材粒徑及有效成分含量的影響，為臨床減少三七用藥劑量及合理利用資源提供依據(jù)。
　　1 材料
　　WZJ-16B1振動式超微粉碎機（濟南倍利粉技術(shù)工程有限公司）；安捷倫1200高效液相色譜儀（美國HP公司）；ELSD2000ES蒸發(fā)光散射檢測器（Alltech公司）；Mastersizer 2000激光衍射法粒度儀結(jié)合干法進樣器Scirocco 200（英國馬爾文儀器有限公司）；無污染顎式破碎機（武漢微型電機廠）；DFy-600 g粉碎機（溫嶺市林大機械有限公司）。
　　三七藥材購自西安盛興中藥飲品有限責任公司，經(jīng)中國中醫(yī)科學院中藥研究所李先端研究員鑒定為五加科人參屬多年生草本植物三七P. notoginseng （Burk.） F.H.chen的干燥根和根莖；人參皂苷Rg₁，Rb₁，三七皂苷R₁（批號分別為110703-201128，110704-201223，110745-200617），純度大于98%，均購自中國食品藥品檢定研究院；乙腈（Fisher公司）為色譜純；自制高純水，甲醇為分析純。
　　2 方法與結(jié)果
　　2.1 三七藥材普通粉與超微粉的制備
　　2.1.1 三七普通粉的制備 稱取適量三七藥材，烘干，用無污染顎式破碎機破碎，呈小塊狀。再將破碎的三七藥材用DFy-600g粉碎機粉碎后得到三七粗粉，即三七普通粉。
　　2.1.2 三七超微粉的制備 按照2.1.1項下制備三七普通粉，分為4份，再分別用振動式超微粉碎機粉碎0.5，1，1.5，2 h，用Mastersizer 2000激光衍射法粒度儀測定其粒徑分布[4]，重復測量3次，統(tǒng)計不同粉碎時間得到的三七粉D₅₀（中位粒徑）、D₉₀（90%粒徑值）[7]的均值，結(jié)果見表1，各時間點的粒徑分布見圖1。
　　2.2 三七超微粉中人參皂苷Rg₁，Rb₁，三七皂苷R₁的含量測定
　　2.2.1 色譜條件的考察 分別采用HPLC紫外檢測器和蒸發(fā)光檢測器進行測定三七超微粉的樣品，結(jié)果見圖2，與HPLC-UV相比，HPLC-ELSD分離效果好，避免了波長在203 nm時紫外末端吸收差，基線漂移等問題，因此選用HPLC-ELSD的色譜條件來進行含量測定。
　　2.2.2 色譜條件 MERCK RP-C₁₈色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流動相乙腈（A）-水（B），梯度洗脫：0～20 min，21%～50% A；流速1 mL·min^-1；漂移管溫度105 ℃。
　　2.2.3 對照品溶液的制備 分別精密稱取三七皂苷R₁、人參皂苷Rg₁及人參皂苷Rb₁對照品適量，加甲醇制成每1 mL分別含上述成分0.2，0.5，0.4 mg的混合對照品溶液，即得，見圖3。

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