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        茶葉浸提液對小鼠學(xué)習(xí)記憶能力影響的初步研究

        發(fā)布時間:2019-09-02 來源: 日記大全 點擊:

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          摘 要:茶對人體具有降三高、減肥、提神、防老年癡呆癥等功效。然而學(xué)校大多數(shù)同學(xué)在口渴的情況下選擇喝茶葉水人數(shù)比例只占12.3%。因此,研究喝茶可能提高記憶能力、飲茶是否對青少年智力發(fā)展具有幫助具有意義。本文通過3項實驗,分別分析了不同配比的茶葉浸提液中茶多酚的含量測定,不同加工方式的茶葉浸提液對小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響,不同濃度的茶葉浸提液對小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響,最終喝茶對青少年智力發(fā)展具有一定作用的結(jié)論。
          關(guān)鍵詞:茶葉浸提液;小鼠;學(xué)習(xí);記憶能力;影響
          中圖分類號:R944.26 文獻標識碼:A DOI:10.11974/nyyjs.20160832075
          緒論
          資料[1-2]表明,長期飲用碳酸飲料容易引起肥胖、糖尿病、骨質(zhì)疏松等癥。通過調(diào)查問卷方式了解到在口渴情況下大多數(shù)同學(xué)是喝白開水,喝茶葉水(簡稱喝茶)比例只有12.3%。茶,是中華民族的舉國之飲,中國幾千年的飲茶史,足以證明飲茶的重要性。有資料[3]表明,茶葉中有益的成份主要是茶多酚和茶多糖,喝茶對人體有許多益處:如降血糖、降血壓、降血脂,可減肥、提神等,還可以防老年癡呆癥。
          老年癡呆癥的癥狀之一是漸進式記憶障礙,而記憶能力是智力的重要組成,對學(xué)習(xí)能力影響非常大。青少年時期是一個人智力發(fā)展的高峰期,在國家提倡大健康的背景下,飲茶能否對青少年智力發(fā)展提供有益的幫助,這是值得研究的問題。通過查閱文獻,相關(guān)研究資料很少。因此決定建立“茶葉浸提液對小鼠學(xué)習(xí)記憶能力影響的初步研究”課題,對該問題進行研究。
          1 材料和方法
          課題組從2015年9月—2016年2月,利用課余、節(jié)假日,進行了以下3項實驗研究,分別是不同配比的茶葉浸提液中茶多酚含量的測定、不同加工方式的茶葉浸提液對小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響、不同濃度的茶葉浸提液對小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響。
          1.1 實驗1
          不同配比的茶葉浸提液中茶多酚含量的測定
          1.1.1 實驗材料
          本實驗材料采用按制造工藝分類的茶葉,即紅茶和綠茶,采用市場上常見的品牌和產(chǎn)地茶葉。實驗使用的綠茶為一級的龍井茶,產(chǎn)地是浙江杭州錢塘產(chǎn)區(qū),產(chǎn)品標準號為GB/T18650 ,廠商是杭州憶江南茶業(yè)有限公司;紅茶則為一級大紅袍,原料產(chǎn)地為云南臨滄,而產(chǎn)地則是福建漳州,產(chǎn)品標準號為GB/T13738.2,廠商是漳州天福茶業(yè)有限公司。另外,本次實驗還用到了購買于上海金穗生物科技有限公司的茶多酚標準品(含量≥98%)、 KMnO4溶液、3moL/L H2SO4溶液、鄰二氮菲亞鐵指示劑(0.025moL/L)等。
          1.1.2 實驗樣品配置
          茶葉浸提液配比時,統(tǒng)一使用75mL的沸水,通過控制茶葉的重量來提取不同濃度的茶葉浸提取液。具體是分別將0.75g、0.83g、0.94g、1.07g、1.25g、1.50g、1.88克、2.50g、3.75g、7.50g的茶葉放入75mL的沸水中浸泡10min,得到配比為1:100、1:90、1:80、1:70、1:60、1:50、1:40、1:30、1:20、1:10的浸提液。
          1.1.3 實驗方法
          在本次實驗中主要采用的是高錳酸鉀滴定法[5],用于測定各樣品中茶多酚的含量。
          1.2 實驗2
          不同加工方式的茶葉浸提液對小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響
          1.2.1 實驗材料
          本次實驗使用的動物是ICR雄性小鼠,鼠齡3周(浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實驗動物中心購得,許可證號:scxk(浙)2008-0033),飼料是由浙江省實驗動物飼料生產(chǎn)基地、浙江省實驗動物中心共同制造的,執(zhí)行標準為GB14924-2001。另外,墊料是經(jīng)121℃、30min高壓蒸汽滅菌木質(zhì)刨花,浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實驗動物中心購得,綠茶和紅茶與實驗一的相同。
          1.2.2 實驗分組
          實驗分為3組,分別為:對照1組——小鼠11只,飲用水為去氯自來水(存放24h后自來水);綠茶組——小鼠15只,飲用水為配比1:30的綠茶浸提液;紅茶組——小鼠15只,飲用水為配比1:30的紅茶浸提液。3組小鼠其它生活條件相同。根據(jù)文獻[4]和人們的喝茶習(xí)慣,本實驗采用配比為1:30的茶葉浸提液。
          1.2.3 實驗方法
          1.2.3.1 觀察法
          觀察法主要指的是在學(xué)校實驗室,小鼠自由攝食,飲水,飼養(yǎng)觀察35d,每天觀察小鼠活動情況,記錄小鼠飲水量,攝食量,每周稱量小鼠體重。
          1.2.3.2 Morris水迷宮實驗
          在飼養(yǎng)35d后,小鼠在水迷宮實驗室適應(yīng)3d,進行Morris水迷宮實驗。實驗分為“定位航行”和“空間搜索”2部分,定位航行實驗4d,每天記錄小鼠潛伏期;空間搜索實驗1d,記錄小鼠穿越平臺次數(shù)和Ⅰ象限的時間,通過這些數(shù)據(jù)來測試小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。
          1.2.3.3 生化指標檢測
          水迷宮實驗結(jié)束后,解剖小鼠,提取腦組織,檢測腦組織丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性。主要包括MDA含量測定和SOD活性測定,其中MDA含量測定主要采用的是硫代巴比妥酸(TBA)法[6],操作步驟按MDA測定試劑盒說明操作,而SOD活性測定則是采用WST-1法[7],按SOD測試盒說明操作。
          1.3 實驗3
          不同濃度的茶葉浸提液對小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響
          1.3.1 實驗材料
          本實驗采用的實驗材料與實驗二的相同
          1.3.2 實驗分組為
          對照2組——10只,飲用水為去氯自來水(存放24h后自來水);綠茶組(1:10)——10只,飲用水為配比1:10的綠茶浸提液;綠茶組(1:30)——10只,飲用水為配比1:30的綠茶浸提液;綠茶組(1:100)——10只,飲用水為配比1:100的綠茶浸提液;紅茶組(1:10)——10只,飲用水為配比1:10的紅茶浸提液;紅茶組(1:30)——10只,飲用水為配比1:30的紅茶浸提液;紅茶組(1:100)——10只,飲用水為配比1:100的紅茶浸提液。

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