斷面紅棕色及類白色土茯苓藥材中總鞣質(zhì)的含量分析
發(fā)布時間:2019-08-28 來源: 散文精選 點(diǎn)擊:
[摘要] 土茯苓在藥材斷面有類白色及淡紅棕色2種。在前期的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),2種斷面顏色的土茯苓在抗炎效果和化學(xué)成分方面有較大差異。該文首次以紫外-可見分光光度法對28個不同采集地?cái)嗝婕t棕色及類白色土茯苓中的總鞣質(zhì)含量進(jìn)行比較分析,旨在為該藥材資源的合理開發(fā)利用及質(zhì)量控制提供一定的實(shí)驗(yàn)及理論依據(jù)。在實(shí)驗(yàn)中對2010年版《中國藥典》鞣質(zhì)含量測定方法中加樣回收進(jìn)行了改進(jìn),以鞣酸代替沒食子酸進(jìn)行加樣回收試驗(yàn)。
[關(guān)鍵詞] 斷面紅棕色及類白色土茯苓;總鞣質(zhì);加樣回收;鞣酸;紫外-分光光度法
土茯苓為百合科植物光葉菝葜Smilax glabra的干燥根莖。具除濕,解毒,通利關(guān)節(jié)之功能[1]。歷版《中國藥典》均記載土茯苓在藥材斷面有類白色及淡紅棕色2種,本課題組長期調(diào)查的結(jié)果表明,全國藥材市場上根據(jù)其產(chǎn)地不同,將斷面紅色或白色分為2類來分別使用,如四川、廣東、廣西、浙江產(chǎn)者為斷面類白色,貴州、湖南產(chǎn)者為斷面紅棕色,從而使該藥材在應(yīng)用上多樣化、復(fù)雜化。在前期的實(shí)驗(yàn)中作者發(fā)現(xiàn),土茯苓有較好的抗炎作用,2種斷面顏色的土茯苓在化學(xué)成分方面也存在較大差異。而鞣質(zhì)是植物界中普遍存在的一類次生代謝產(chǎn)物,具有抗菌、抗病毒和抗腫瘤的作用,近年來越來越多的研究表明鞣質(zhì)具有清除生物體內(nèi)過剩的自由基,維護(hù)細(xì)胞膜的流動和蛋白質(zhì)的構(gòu)象,從而在抑制脂質(zhì)過氧化及心血管病、抗腫瘤、抗突變、抗衰老、抗白內(nèi)障等方面有獨(dú)到功效[2]。故鞣質(zhì)是天然的抗氧化劑,在土茯苓中有收斂、止血、抗炎及抗菌的作用。而有關(guān)斷面紅棕色及類白色土茯苓藥材鞣質(zhì)的含量未見報(bào)道,故本文首次對28個不同采集地?cái)嗝婕t棕色及類白色土茯苓中的總鞣質(zhì)含量進(jìn)行比較分析,旨在為該藥材資源的合理開發(fā)利用及質(zhì)量控制提供一定的實(shí)驗(yàn)及理論依據(jù)。
1材料
紫外-可見分光光度計(jì)(GBC-20,澳大利亞照生公司)、超聲提取儀(SK8210LHC,上?茖(dǎo)超聲儀器有限公司)、1/1萬分析天平(AB104-N,梅特勒上海有限公司)、沒食子酸對照品(批號110831-200302,中國食品藥品檢定研究院)、鞣酸、無水碳酸鈉、鎢酸鈉、鉬酸鈉、鹽酸、磷酸、硫酸鋰、溴、干酪素等均為分析純,蒸餾水為實(shí)驗(yàn)室自制。磷鉬鎢酸試液按2010年版《中國藥典》附錄中的方法配制。
所有采集樣品、購買飲片均由貴陽中醫(yī)學(xué)院生藥教研室董立莎教授鑒定為百合科植物光葉菝葜S. glabra的根莖,憑證標(biāo)本保存于貴陽中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院生藥教研室。樣品均采用自然陰干的方法干燥。
2方法與結(jié)果
2.1對照品溶液的配制
精密稱取沒食子酸對照品45.68 mg于100 mL棕色量瓶中,加水溶解并稀釋至刻度,精密量取10 mL,置100 mL棕色量瓶中,用水稀釋置刻度,搖勻,即得(每1 mL中含沒食子酸0.045 68 mg)。
2.2供試品溶液的配制
精密平行稱取土茯苓藥材粉末1.5 g,各3份,分別置250 mL棕色量瓶中,加150 mL 60%乙醇,放置過夜,超聲處理20 min,放冷,用水稀釋至刻度,搖勻,靜置(使固體物沉淀),濾過,棄去初濾液50 mL,精密量取續(xù)濾液20 mL,置100 mL量瓶中,用水稀釋至刻度,搖勻,即得。
2.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
精密量取沒食子酸對照品溶液0.5,1.0,2.0,3.0,5.0 mL分別置25 mL棕色量瓶中,各加入磷鉬酸試液1 mL,再分別加水11.5,11,10,9,7 mL,用29%碳酸鈉溶液稀釋置刻度,搖勻,放置30 min以相應(yīng)的試劑為空白對照,在760 nm波長處測定吸收度,以吸光度為縱坐標(biāo),對照品質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),繪制坐標(biāo)曲線。得回歸方程Y=0.008 4X-0.000 3,r=0.999 0。結(jié)果表明沒食子酸在0.914~7.309 mg·L-1成良好的線性關(guān)系。
2.4測定用溶液的配制
2.4.1土茯苓(斷面紅棕色)總酚測定用溶液的配制 精密量取2.2項(xiàng)下制備的溶液10 mL,置25 mL棕色量瓶中,用水稀釋至刻度,搖勻,精密量取所配溶液2 mL,置25 mL棕色量瓶中,按2.3項(xiàng)下的方法,自“加入磷鉬酸試液1 mL”起,加水10 mL即得。
2.4.2土茯苓(斷面類白色)總酚測定用溶液的配制 精密量取2.2項(xiàng)下制備的溶液2 mL,置25 mL棕色量瓶中,按2.3項(xiàng)下的方法,自“加入磷鉬酸試液1 mL”起,加水10 mL即得。
2.4.3不被吸附的多酚測定溶液的配制 精密量取供試品溶液25 mL加至已盛有0.8 g干酪素的100 mL具塞錐形瓶中,密塞,置30 ℃水浴中保溫1 h,時時振搖,取出,放冷,搖勻,濾過,棄去初濾液,精密量取續(xù)濾液2 mL,置25 mL棕色量瓶中,加入磷鉬酸試液1 mL,加水10 mL即得。
2.5測定條件的選擇
2.5.1檢測波長的選擇 取沒食子酸對照品和總酚比色液,按照2.3項(xiàng)下方法顯色,分別在600~900, 400~900 nm進(jìn)行全波長掃描,得出最大吸收波長為760 nm,與2010年版《中國藥典》記載一致。
2.5.2干酪素用量的選擇 為了評價(jià)干酪素吸附鞣質(zhì)的效率,對干酪素的用量進(jìn)行了考察。分別精密量取5份都勻楊梅山樣品溶液各25 mL于分別裝有0.4,0.5,0.6,0.7,0.8 g干酪素的100 mL錐形瓶中,分別密塞,置30 ℃水浴中保溫1 h,時時振搖,取出,放冷,搖勻,濾過,棄去初濾液,精密量取續(xù)濾液2 mL,置25 mL棕色量瓶中,按2.3項(xiàng)下的方法,自“加入磷鉬酸試液1 mL”起,加水10 mL,即得。結(jié)果表明隨著干酪素用量的增加游離多酚的含量逐漸減少,當(dāng)達(dá)到0.8 g時,溶液中游離多酚的含量不再減少,說明鞣質(zhì)已經(jīng)被干酪素吸附完全,因此確定干酪素用量為0.8 g。
熱點(diǎn)文章閱讀