不同炮制品瑞香狼毒藥材急性毒性試驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2019-08-29 來(lái)源: 散文精選 點(diǎn)擊:
摘要 [目的]通過(guò)對(duì)瑞香狼毒藥材急性毒性試驗(yàn)的研究,對(duì)瑞香狼毒生品、醋制品和姜礬制品的急性毒性進(jìn)行比較,為瑞香狼毒炮制工藝的規(guī)范化和臨床用藥安全提供試驗(yàn)依據(jù)。[方法]按照經(jīng)典急性毒性試驗(yàn)方法,各組試驗(yàn)連續(xù)觀察10d,計(jì)算各組動(dòng)物死亡數(shù),采用Bliss法計(jì)算小鼠的LD50及其95%的可信限。[結(jié)果]瑞香狼毒生品LD50=547.56mg/kg,其95%的可信限為476.86~625.58mg/kg;醋制品LD50=689.23mg/kg,其95%的可信限為546.96~817.22mg/kg;姜礬制品LD50=976.89mg/kg,其95%的可信限為826.95~1134.50mg/kg。[結(jié)論]瑞香狼毒生品經(jīng)炮制后毒性有所降低,毒性由小到大的排列順序?yàn)榻\制品<醋制品<生品。
關(guān)鍵詞 瑞香狼毒;炮制品;急性毒性試驗(yàn)
中圖分類(lèi)號(hào) S567 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 0517-6611(2015)09-072-01
瑞香狼毒其主要的活性成分有黃酮類(lèi)、二萜類(lèi)、香豆素類(lèi)以及木脂素類(lèi)化合物[1]。文獻(xiàn)資料報(bào)道瑞香狼毒中黃酮類(lèi)和二萜原酸酯類(lèi)具有較強(qiáng)的體內(nèi)和體外抗腫瘤作用,同時(shí)也是瑞香狼毒的主要有毒成分[2]。所以,采用適當(dāng)?shù)呐谥品椒ǹ梢员苊庥行С煞值膿p失,降低毒性。筆者通過(guò)對(duì)瑞香狼毒藥材急性毒性試驗(yàn)的研究,計(jì)算急性毒性參數(shù),對(duì)生品、醋制品和姜礬制品的毒性進(jìn)行比較,為瑞香狼毒炮制工藝的規(guī)范化和臨床用藥安全提供試驗(yàn)依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
清潔級(jí)昆明種小鼠,體重18~22g,雌雄各半,由大連醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,使用許可證號(hào)SCXK(遼)2013-0002。
1.2 試驗(yàn)藥品
瑞香狼毒藥材購(gòu)自于內(nèi)蒙古,經(jīng)遼寧中醫(yī)藥大學(xué)王冰教授鑒定為正品藥材。瑞香狼毒生品、醋制品和姜礬制品的樣品液均自制。
1.3 樣品液的制備
精密稱取瑞香狼毒生品、醋制品和姜礬制品的粉末各(過(guò)60目篩)50g,分別加入95%乙醇500ml,加熱回流1h,過(guò)濾,濾液濃縮,蒸干,得干膏,用30%的1,2丙二醇為溶劑,超聲溶解備用。
1.4 主要儀器與設(shè)備
電子分析天平(D432810821);腹腔注射器等。
1.5 劑量與分組
通過(guò)預(yù)試驗(yàn)所得到的全死劑量和全不死劑量,設(shè)定給藥劑量,組距=0.8。同時(shí)設(shè)立溶媒對(duì)照組,即30%的1,2丙二醇組,以觀察溶劑是否對(duì)小鼠產(chǎn)生影響。給藥劑量分組情況如表1所示。
1.6 急性毒性測(cè)定 生品組、醋制品組和姜礬制品組中清潔級(jí)小鼠各50只,體重18~22g,雌雄各半,按體重隨機(jī)分為5組,每組10只。試驗(yàn)前禁食(不禁水)12h,采用腹腔注射法,注射劑量0.2ml/10g。各組連續(xù)觀察10d,計(jì)算各組動(dòng)物死亡數(shù),采用Bliss法計(jì)算小鼠的LD50及其95%的可信限。
2 結(jié)果與分析
2.1 瑞香狼毒生品組急性毒性試驗(yàn)
由表2可見(jiàn),按瑞香狼毒生品組劑量等級(jí)1組給藥后,小鼠明顯出現(xiàn)活動(dòng)困難、呼吸急促,死亡時(shí)間短暫,最短時(shí)間約3min,其余小鼠30min內(nèi)全部死亡;劑量等級(jí)5組給藥,小鼠死亡率明顯下降,僅有1只小鼠死亡;其他等級(jí)給藥,小鼠明顯活動(dòng)困難,呼吸急促、步態(tài)不穩(wěn)。死亡率按照用藥劑量的降低有所升高。給藥24h后,未亡小鼠飲食飲水逐漸恢復(fù)正常,存活小鼠產(chǎn)生的毒性反應(yīng)隨時(shí)間慢慢恢復(fù)?瞻讓(duì)照組和溶媒對(duì)照組未見(jiàn)有小鼠異常反應(yīng)和死亡。
2.2 瑞香狼毒醋制品組急性毒性試驗(yàn)
表3顯示,按瑞香狼毒醋制品組劑量等級(jí)1組給藥后,小鼠同樣出現(xiàn)活動(dòng)困難、呼吸急促,但死亡時(shí)間延長(zhǎng),在12h內(nèi)陸續(xù)死亡,僅有1只小鼠存活;劑量等級(jí)5組給藥,小鼠死亡率下降,僅有2只小鼠死亡;其他等級(jí)給藥,小鼠肌肉痙攣明顯,靜伏少動(dòng),死亡時(shí)間延長(zhǎng)至48h?瞻讓(duì)照組和溶媒對(duì)照組未見(jiàn)有小鼠異常反應(yīng)和死亡。
2.3 瑞香狼毒姜礬制品組急性毒性試驗(yàn)
按瑞香狼毒姜礬制品組劑量等級(jí)1組給藥后,小鼠死亡時(shí)間延長(zhǎng)至48h內(nèi)陸續(xù)死亡,1只小鼠存活;劑量等級(jí)5組給藥,小鼠死亡率下降,僅有1只小鼠死亡;其他等級(jí)給藥,死亡時(shí)間延長(zhǎng)至60h。
空白對(duì)照組和溶媒對(duì)照組未見(jiàn)有小鼠異常反應(yīng)和死亡(表4)。
2.4 LD50及其可信限
由表5可知,生品LD50=547.56mg/kg,其95%的可信限為476.86~625.58mg/kg;醋制品LD50=689.23mg/kg,其95%的可信限為546.96~817.22
mg/kg;姜礬制品LD50=976.89mg/kg,其95%的可信限為826.95~1134.50mg/kg。
表5 瑞香狼毒不同炮制品急性毒性試驗(yàn)LD50的測(cè)定結(jié)果
組別LD50mg/kgLD5095%可信限∥mg/kgLD50提高指數(shù)
瑞香狼毒生品547.56476.86~625.581.0000
瑞香狼毒醋制品689.23546.96~817.211.2587
瑞香狼毒姜礬制品976.89826.95~1134.501.7841
3 小結(jié)與討論
試驗(yàn)結(jié)果表明瑞香狼毒經(jīng)炮制后毒性有所降低,毒性由小到大的排列順序?yàn)榻\制品<醋制品<生品,說(shuō)明瑞香狼毒經(jīng)姜礬制后毒性降低的程度優(yōu)于醋制,確實(shí)達(dá)到了降低毒性,提高用藥安全性的作用。
現(xiàn)今文獻(xiàn)報(bào)道中,對(duì)瑞香狼毒生品的藥效藥理、毒性試驗(yàn)報(bào)道的較多,而其醋制品和姜礬制品方面的文獻(xiàn)報(bào)道較少。該試驗(yàn)將其生品和炮制品在急性毒性方面的不同進(jìn)行研究,通過(guò)三者的LD50及LD50的可信限,比較三者毒性強(qiáng)弱順序,對(duì)進(jìn)一步了解炮制作用、闡明炮制機(jī)理具有重要意義。
參考文獻(xiàn)
[1]王敏.瑞香狼毒總黃酮提取物的抗腫瘤作用[J].中國(guó)中藥雜志,2005,30(8):603-606.
[2]湯亞杰,徐小玲,李冬生,等.瑞香狼毒化學(xué)成分與抗腫瘤作用研究進(jìn)展[J].中成藥,2008,30(7):21-23.
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