摘要：本文通過查閱近年來相關資料，從性狀、顯微、分子標記、高效液相等鑒定，概述貝母類藥材鑒定技術近年來的研究進展，為今后貝母類藥材的鑒定提供參考。
　　關鍵詞：貝母類藥材；鑒定技術；研究進展
　　中圖分類號：R282.5 文獻標識碼：A DOI編號：10.14025/j.cnki.jlny.2016.10.028
　　貝母類藥材作為臨床上的常用藥，其來源復雜，經(jīng)常出現(xiàn)偽品。本文綜述貝母類藥材的鑒定方法，對今后的貝母類藥材的應用有較高的實踐意義。
　　1 性狀鑒定
　　性狀鑒定主要是觀察完整的中藥及中藥飲片。唐生斌等運用性狀的不同特征對貝母類藥材及它的混淆品、偽品等進行對比研究，得出不同樣品的性狀具有一定的差異，可以將性狀特征的差異作為貝母屬種間鑒別的參考依據(jù)。
　　浙貝母：扁圓球形，高10～20毫米，直徑10～35毫米，二瓣，類腎形，近等大，表面稍粗糙，類白色至淡黃色，內表面淡棕色。
　　湖北貝母：扁圓球形，高6～22毫米，直徑6～35毫米，二瓣，類腎形，多數(shù)大小懸殊，表面稍粗糙（有的可見棕色斑點），類白色至淡棕色。
　　伊貝母：新疆貝母為類球形略扁，高5～10毫米，直徑6～12毫米，二瓣，月牙形，近等大，緊靠，類白色，表面光滑。伊犁貝母為圓錐形或類球形，高8～12毫米，直徑10～25毫米，二瓣，心形，近等大，類白色或淡黃色，表面稍粗糙。
　　平貝母：扁球形，高5～10毫米，直徑6～20毫米，二瓣，大小相近相對抱合，乳白色或淡黃白色，表面光潔。
　　川貝母：松貝為類圓錐形或近球形，高3～8毫米，直徑3～9毫米，二瓣，大小懸殊，呈懷中抱月形，類白色，表面光潔。青貝為類球形或扁球形，高4～14毫米，直徑4～16毫米，二瓣，大小相近，相對抱合，類白色，表面光潔。爐貝為長圓錐形或略扁斜，高7～25毫米，直徑5～25毫米，二瓣，大小相近，相對抱合，類白色或淺棕黃色，表面有的具有棕色斑點。
　　2 顯微鑒定
　　顯微鑒別是鑒別貝母類藥材的重要方法之一，可以通過藥材的粉末顏色，淀粉粒大小、形狀，層紋形狀、有無，臍點位置、形狀等多種因素進行區(qū)別。
　　通過比較可知，浙貝母粉末為淡黃色，湖北貝母、川貝母、伊貝母、平貝母粉末為類白色。浙貝母區(qū)別于其他貝母的最大區(qū)別是可見草酸鈣針晶，川貝母、平貝母、伊貝母粉末均有多臍點單粒和復粒，川貝母中多臍點單粒數(shù)目最多，浙貝母中復粒最多。平貝母、浙貝母、伊貝母粉末中的淀粉顆粒邊界較光滑，湖北貝母有起伏，而川貝母有短分枝，這可分別作為鑒別湖北貝母和川貝母的一大特征。湖北貝母淀粉粒層紋最為明顯，這一特點也成為5種貝母中湖北貝母的最大鑒別特征。
　　3 薄層色譜（TCL）鑒定
　　黃小鷗等“采用了氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水（40：40：15：10）的下層溶液和正己烷-醋酸乙酯-二乙胺（11：14：1：5）兩個溶劑系統(tǒng)作為鑒別湖北貝母、川貝母、平貝母、浙貝母和伊貝母薄層色譜法的溶劑系統(tǒng)，通過譜圖可知伊貝母中含有西貝母堿，無貝母素甲和貝母素乙，而其他四種貝母則含有貝母素甲和貝母素乙，無西貝母堿。吳曉民等運用薄層色譜法對不同品種、產(chǎn)地、采收期的平貝母和偽品之間進行了比較和分析，其結果顯示，不同采收期及不同產(chǎn)地的平貝母譜圖相近，而不同品種的平貝母和平貝母偽品的譜圖之間有著明顯差異，所以采用薄層色譜（TCL）鑒定法可以對平貝母藥材的鑒別提供有利依據(jù)。
　　4 分子標記鑒定
　　從分子遺傳學角度來看，基因型的差異是物種表現(xiàn)型的主要差異，即DNA序列上的差異，這種差異是個體的差異并且不受環(huán)境影響，所以通過對基因型差異的比較研究也能進行植物分類和鑒定。同時隨著新科學技術的不斷發(fā)展創(chuàng)新，出現(xiàn)了分子生物學鑒定方法，所以通過分子標記技術對中藥基原植物及其飲片鑒定得到了極大的發(fā)展。
　　4.1 隨機引物擴增多態(tài)性DNA（RAPD）
　　李玉鋒等運用RAPD技術分析了8種貝母其基因組DNA多態(tài)性以及構建了樹狀聚類圖，結果顯示親緣關系最近的為產(chǎn)地相同的川貝母和康定貝母，但產(chǎn)地不同的伊貝母、浙貝母、平貝母與川貝母等相同產(chǎn)地的貝母遺傳距離相對較遠。因此可知，地理的分布距離越小，貝母的遺傳差異性越小，反之則越大。尹春萍等對暗紫貝母和湖北貝母采用RAPD法篩選出特異性高的引物進行準確區(qū)分。龔伯奇通過RAPD技術進行分析了青海省四個地區(qū)的暗紫貝母遺傳多樣性，通過獲得的多態(tài)性信息將每個樣地的樣品準確地將聚類在一起。周潔采用RAPD標記和ISSR標記相結合的技術對12個浙貝母的品種進行了分子鑒定，將地種植的貝母類群和磐安引種貝母劃分開，發(fā)現(xiàn)了RAPD的聚類結果與ISSR標記得到的聚類結果基本一致，從而肯定了RAPD技術的鑒定準確性。
　　4.2 簡單重復區(qū)間標記技術（inter-simple sequencerepeat，ISSR）
　　通過對SSR技術進行改進后得到了新型分子標記技術，ISSR技術是以SSR序列為引物并在3"端或者5"端加上2～4個隨機核苷酸，PCR過程中使錨定引物引起特意位點的退火，使重復序列間DNA片段成功擴增。因為不同物種、不同品種的SSR在基因組中的位置和數(shù)量均具有差異性，所以擴增結果將不同，這種結果又叫做多態(tài)性。劉曉賢等對2個川貝母居群、1個皖貝母居群、1個東貝母居群和8個浙貝母居群采用ISSR-PCR技術進行分析，結果表明和其他產(chǎn)區(qū)浙貝居群相比，磐安地區(qū)的浙貝居群有明顯的區(qū)別，且長期的留種栽培使磐安浙貝遺傳多樣性水平降低，所以形成了相對穩(wěn)定的遺傳。王果平等運用ISSR技術對新疆貝母屬的遺傳多樣性進行聚類分析，把十種貝母分成三個類群。結果表明聚類在一起的為托里貝母、黃花貝母、小白花貝母和大白花貝母。趙鑫等㈣探究了Mg²⁺濃度、引物、dNTP和TagDNA聚合酶用量這四個要素對伊貝母ISSR-PCR擴增的影響，并確定了伊貝母ISSR反應體系，這對其他貝母屬藥用植物的ISSR反應體系的建立具有指導作用。

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