波形蛋白在子宮頸鱗癌中的表達(dá)及臨床意義
發(fā)布時(shí)間:2018-06-23 來源: 散文精選 點(diǎn)擊:
【摘要】 目的 探討子宮頸鱗癌組織中波形蛋白(Vimentin)的表達(dá)及其與臨床特征之間的關(guān)系。
方法 選取12例子宮頸上皮正;颊摺13例宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)Ⅰ級(jí)患者、21例CINⅡ~Ⅲ級(jí)患者、42例子宮頸鱗癌患者作為研究對(duì)象, 采用免疫組化法檢測其組織中Vimentin表達(dá)情況, 觀察不同組織類型的Vimentin表達(dá)差異及子宮頸鱗癌Vimentin表達(dá)與臨床病理特征的相關(guān)性。結(jié)果 正常的子宮頸上皮細(xì)胞組織中Vimentin的表達(dá)率為0(0/12), 均呈陰性;CINⅠ級(jí)組織中Vimentin的高、低表達(dá)率分別為0(0/14)、23.1%(3/13);CINⅡ~Ⅲ級(jí)組織Vimentin的高、低表達(dá)率分別為0(0/21)、47.6%(10/21);子宮頸鱗癌組織中Vimentin的高、低表達(dá)率分別為16.7%(7/42)、71.4%(30/42);不同組織間Vimentin表達(dá)率比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。Vimentin表達(dá)與子宮頸鱗癌臨床分期以及淋巴轉(zhuǎn)移呈明顯相關(guān)關(guān)系(r=0.816、0.799, P=0.007、0.040<0.05)。結(jié)論 Vimentin表達(dá)的升高對(duì)子宮頸鱗癌的發(fā)展起重要推動(dòng)作用, 且Vimentin表達(dá)與淋巴轉(zhuǎn)移等有密切關(guān)系。
【關(guān)鍵詞】 子宮頸鱗癌;波形蛋白表達(dá);臨床特征;病理特征
DOI:10.14163/j.cnki.11-5547/r.2018.12.023
子宮頸癌是嚴(yán)重威脅婦女生命健康的生殖系統(tǒng)惡性腫
瘤[1]。以往研究發(fā)現(xiàn)人乳頭瘤狀病毒(HPV)感染與宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān), 但具體發(fā)病機(jī)制仍不清楚。已有研究表明 [2], 在人乳頭瘤狀病毒感染的正常上皮細(xì)胞中發(fā)生上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)現(xiàn)象[3]。Vimentin是一種重要的Ⅲ型中間絲纖維蛋白, 可作為組織病理學(xué)診斷中鑒別腫瘤細(xì)胞分化起源的特異性生物標(biāo)記物[4]。Vimentin的高表達(dá)意味著EMT過程的發(fā)生開啟了腫瘤轉(zhuǎn)移過程, 是引起腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵步驟。作者觀察了Vimentin在宮頸癌及其前期病變中的定位與表達(dá)水平, 探討Vimentin表達(dá)情況與臨床特征之間的關(guān)系, 報(bào)告如下。
1 資料與方法
1. 1 一般資料 選取2015年6月~2017年6月遼陽市第五人民醫(yī)院收治的12例子宮頸上皮正;颊撸ㄐ腥訉m加雙附件切除子宮肌瘤)、13例CINⅠ級(jí)患者、21例CINⅡ~Ⅲ級(jí)
患者、42例子宮頸鱗癌患者作為研究對(duì)象, 所有患者在手術(shù)前都沒有采取任何治療措施。所有患者的診斷均經(jīng)過經(jīng)病理檢查證實(shí)。子宮頸鱗癌患者年齡31~59歲, 平均年齡48歲;CINⅠ級(jí)患者年齡31~56歲, 平均年齡47歲;CINⅡ~Ⅲ級(jí)患者年齡29~58歲, 平均年齡46歲;子宮頸上皮正;颊吣挲g40~60歲, 平均年齡51歲。各類型患者年齡等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05), 具有可比性。
1. 2 方法 采集所有研究對(duì)象子宮頸組織制作標(biāo)本, 標(biāo)本經(jīng)常規(guī)多聚甲醛固定、連續(xù)切片、石蠟包埋。所采集的標(biāo)本經(jīng)液氮冷凍后, 轉(zhuǎn)入-70℃冰箱中保存?zhèn)溆肹5]。免疫組織化學(xué)用鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物霉連結(jié)法(SP)法, 用己知陽性片作陽性對(duì)照, 磷酸鹽平衡生理鹽水(PBS)代替一抗作陰性對(duì)照。將切片進(jìn)行脫蠟至水;并置于構(gòu)椽酸鹽中, 進(jìn)行高壓修復(fù)抗原, 2 min后取出, 冷卻至室溫;采用3%濃度的過氧化氫封閉, 將內(nèi)源性的過氧化氫酶去除;滴加一抗
(50 μl)后, 在37℃下進(jìn)行孵育, 2 h后用PBS進(jìn)行沖洗, 連續(xù)沖洗3次;再滴加生物素標(biāo)記二抗(50 μl), 在室溫下進(jìn)行孵育, 30 min后用PBS沖洗, 連續(xù)沖洗3次;再滴加二氨基聯(lián)苯胺(DAB)溶液(50 μl), 進(jìn)行蘇木精復(fù)染;將復(fù)染后的組織進(jìn)行梯度乙醇脫水, 用二甲苯透明作為透明劑, 用中樹膠將染好的切片封存。
1. 3 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) Vimentin陽性表達(dá)定位于細(xì)胞質(zhì), 其顆粒染色呈現(xiàn)為黃色和棕黃色。免疫組化評(píng)分采用簡單的半定量方法, 通過著色程度以及陽性細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)獲得, 其計(jì)算公式為:總評(píng)分=著色程度評(píng)分×著色細(xì)胞百分?jǐn)?shù)評(píng)分;其中總評(píng)分0分為陰性表達(dá), 總評(píng)分1~4分為低表達(dá), 總評(píng)分>4分為高表達(dá)。①根據(jù)細(xì)胞的陽性著色程度(即細(xì)胞的抗原含量)評(píng)分得出:0分為陰性;1分為弱陽性;2分為中等陽性;3分為強(qiáng)陽性。②在光鏡下, 任意選取4個(gè)高倍視野(×400), 計(jì)數(shù)出200個(gè)以上的細(xì)胞, 根據(jù)陽性細(xì)胞的百分?jǐn)?shù), 評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)為:0分表示沒有陽性細(xì)胞;1分表示陽性細(xì)胞≤10%;2分表示陽性細(xì)胞在11%~50%;3分表示陽性細(xì)胞在51%~80%;4分表示陽性細(xì)胞>80%。
1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料采用方差分析;計(jì)數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗(yàn);相關(guān)性采用Spearman分析。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié)果
2. 1 子宮頸鱗癌患者臨床病理特征 子宮頸鱗癌患者中年齡<45歲24例、占57.1%, ≥45歲18例、占42.9%;臨床分期Ⅰ期22例、占52.4%, 臨床分期Ⅱ期20例、占47.6%;高、中、低分化宮頸癌病例分別為5、16與21例, 各占11.9%、38.1%與50.0%;淋巴轉(zhuǎn)移者13例、占比31.0%, 未轉(zhuǎn)移者29例、占69.0%;國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO)手術(shù)分期(2000年標(biāo)準(zhǔn)):Ⅰ期22例、占52.4%, Ⅱ期20例、占47.6%。
2. 2 所有研究對(duì)象中Vimentin表達(dá)情況 正常的子宮頸上皮細(xì)胞組織中Vimentin的表達(dá)率為0(0/12), 均呈陰性;CINⅠ級(jí)組織中Vimentin的高、低表達(dá)率分別為0(0/14)、23.1%(3/13);CINⅡ~Ⅲ級(jí)組織Vimentin的高、低表達(dá)率分別為0(0/21)、47.6% (10/21);子宮頸鱗癌組織中Vimentin的高、低表達(dá)率分別為16.7% (7/42)、71.4% (30/42);不同組織間Vimentin表達(dá)率比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
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